Przewlekła choroba ziarniniakowa przedstawiająca 69-letniego mężczyznę czesc 4

Jego córka (II-2) i jej córki (III-3 i III-4) miały zarówno normalne, jak i niedoborowe komórki w teście na nitroblue tetrazolium, co było zgodne z chronicznym przez X stanem chronicznej choroby ziarniniakowej i liolizacją. Wnuk zmarł, zanim można było przeprowadzić specyficzne testy na przewlekłą chorobę ziarniniakową, ale przypuszczalnie rozpoznano chorobę w oparciu o historię kliniczną i patologię pośmiertną. Wszystkie inne badane osoby miały normalną produkcję nadtlenku. Aby zlokalizować ubytek komórkowy w wytwarzaniu nadtlenku, przygotowano frakcje błonowe i cytosolowe z neutrofili pacjenta i badano je w próbie bezkomórkowej oksydazy. Błony neutrofilowe od pacjenta nie wsparły produkcji Superoxide po zmieszaniu z normalnym cytozolem (maksymalna prędkość, 0,2 nmola na minutę na 107 ekwiwalentów komórek), podczas gdy cytosol z neutrofili pacjenta zmieszany z normalnymi membranami wyprodukował 3,2 nmol na minutę na 107 ekwiwalentów komórek . Odpowiadające wartości średnie (. SD) dla membran i cytozolu od zdrowych dawców wynosiły 18,1 . 2,1 nmola na minutę na 107 równoważników komórek błony i 8,8 . 0,1 nmola na minutę na 107 równoważników komórek cytozolu. Nieco niski poziom aktywności zgłaszanej dla cytosolu pacjenta mógł być spowodowany nieoptymalnym stosunkiem cytozolu do błony i innych składników. W użytym teście cytozol ma umiarkowanie wąski pik aktywności przy 106 równoważnikach komórek na studzienkę.13
Analiza cytochromu b
Ryc. 2. Ryc. 2. Analiza spektralna i Western Blot cytochromu b. Panel A pokazuje widmo światła widzialnego neutrofili od pacjenta. Charakterystyczne pasmo przy 559 nm odpowiadało 5,71 pmol cytochromu b na 106 neutrofili. Pasek reprezentuje 0,01 jednostki absorbancji. Panel B pokazuje wyniki analizy Western blot. Ekstrakty neutrofili frakcjonowano na żelu poliakrylamidowym, przeniesiono na nitrocelulozę i sondowano surowicą odpornościową skierowaną przeciw podjednostce cytochromu b gp91-phox (po lewej stronie) lub podjednostce p22-phox (po prawej stronie). Surowicę przygotowaną przeciwko prawie pełnej długości sekwencji gp91-phox zastosowano w pokazanym tu blocie; surowica odpornościowa przygotowana przeciwko C-terminalnemu peptydowi dała ten sam wynik (dane nie pokazane). Strzałki wskazują ciężkie i lekkie łańcuchy. Liczba po lewej stronie każdej plamki oznacza standard masy cząsteczkowej. Ścieżka pokazuje wyniki u normalnego pacjenta, a ścieżka 2 wyniki u pacjenta.
Cytochrom b, który zazwyczaj nie występuje w neutrofilach pacjentów z przewlekłą ziarniniakową chorobą sprzężoną z chromosomem X, mierzono za pomocą spektralnej analizy Western blot ekstraktów neutrofili. Charakterystyczne pasmo alfa cytochromu typu b przy 559 nm było widoczne w próbce pacjenta (ryc. 2A), a obliczona ilość cytochromu b była w prawidłowym zakresie 5,71 pmola cytochromu b na 106 neutrofili. Rezonansowe widmo Ramana wykazało normalny wzór zarówno cytochromu żelazawego jak i żelazowego 558 w próbce spakowanych neutrofili wyizolowanych od pacjenta (dane nie przedstawione). Wygląd podjednostek cytochromu gp9l-phox i p22-phox również wydawał się być prawidłowy w badaniu Western blot wyciągu z neutrofili od pacjenta (ryc.
[hasła pokrewne: produkty zawierajace gluten, grypa zoladkowa u dzieci, trwałe usuwanie owłosienia ]