Amyloidoza z powodu mutacji genu gelsoliny w amerykańskiej rodzinie z dystrofią rogówki typu II ad

Sekwencja cDNA gelsoliny w osoczu (panel A) i sekwencja segmentu genomowego DNA amplifikowanego z leukocytów krwi obwodowej i stałej tkanki odbytu (panel B). Panel A pokazuje pozycję 187 (strzałka), punkt, w którym asparagina jest podstawiona kwasem asparaginowym w wariancie cząsteczki; przybliżona lokalizacja białka podjednostki FAF; części cząsteczki, do której skierowana była królicza poliklonalna surowica anty-FAF i mysie przeciwciało monoklonalne (MAb) stosowane w naszych badaniach; oraz lokalizację starterów (grotów strzałek) użytych do amplifikacji segmentu genomowego DNA zawierającego substytucję odpowiadającą pozycjom od 157 do 196 sekwencji aminokwasowej.24 Nomenklatura przyjęta dla białka podjednostki FAF to AGel, Asn 187 (15). ; 187 odpowiada pozycji substytucji w wydzielanej cząsteczce gelsolinu, a (15) jest pozycją wariantu w podjednostce włókienka amyloidu / 1, 2 w panelu B, sekwencje starterów stosowanych do amplifikacji DNA przez PCR są podkreślono, a podstawienie adeniny za guaninę w kodonie 654, co odpowiada reszcie aminokwasowej 187, jest pudełkowane. Ostatnie badania wykazały istotną zależność między dystrofią rogówkową typu II i gelsoliną, białkiem wiążącym aktynę, która jest również składnikiem normalnego osocza. Białka podjednostki amyloidu u pacjentów z FAF są wewnętrznymi fragmentami 7 do 12 kd wariantowej cząsteczki gelsoliny, z substytucją asparaginy dla kwasu asparaginowego odpowiadającą kodonowi 187 wydzielanej postaci cząsteczki2021 (22). Ryc. 2A). Ta mutacja oddziela się od choroby klinicznej wśród pacjentów w Finlandii.27 Zakończenie aminowe białek podjednostek fibryliny FAF rozpoczyna się od reszty 173 w osoczu gelsoliny; koniec karboksylowy nie został jeszcze zdefiniowany i zidentyfikowano białka podjednostki o różnej długości z tym samym końcem aminowym.20 21 22 23 Przeciwciała poliklonalne przeciwko białku podjednostki amyloidu FAF (Fig. 2A) lub przeciwko syntetycznym peptydom odpowiadającym częściom białka sekwencja białka podjednostki reaguje z amyloidem w tkance (nerka, rogówka i skóra), podczas gdy przeciwciała przeciwko transtyretynie, lekkim łańcuchom immunoglobuliny lub białku AA nie. 22, 29
Niedawno donieśliśmy, że sekcje tkanki z propositus z rodziny amerykańskiej z dystrofią kratownicy typu II opisaną przez nas w 198318 reagowały z przeciwciałami przeciwko białku podjednostki FAF30. Nie można było wykazać immunoreaktywności gelsoliny w tkance rogówkowej od pacjentów z dystrofią sieciową typu I (trzech pacjentów), polimorficzne zwyrodnienie amyloidu (dwóch pacjentów) lub pierwotna dystrofia żelatynowa rogówki (jeden pacjent). Odkrycia te zostały teraz rozszerzone na białka amyloidowe rogówkowe badane za pomocą analizy immunoblotów z przeciwciałami na gelsolin i białka podjednostki FAF. Ponadto, analiza sekwencji DNA i hybrydyzacja z oligonukleotydem specyficznym dla mutacji pokazują, że dwa dotknięte chorobą członkowie rodziny amerykańskiej dzielą tę samą substytucję adeniny od guaniny, którą znaleziono u fińskich pacjentów z neuropatią amyloidową i dystrofią rogówki.
Metody
Propositus był 79-letnim Amerykaninem pochodzenia irlandzkiego z dystrofią rogówki kratownicy, który przeszedł obustronne blepharoplasty górnej i dolnej powieki na zwiotczałe powieki i miał obustronne porażenie nerwu twarzowego po pierwszym badaniu w sierpniu 1982 roku18 (ryc.
[hasła pokrewne: pedicul hermal, sinlac skład, ectoskin p7 ]